（Collagen Induced Arthritis(CIA)胶原诱导的关节炎）
文章关键词：
Arthritis 关节炎；Incomplete Freund’s Adjuvant (IFA) 弗氏不完全佐剂；Complete Freund’s Adjuvant (CFA) 弗氏完全佐剂；Type II Collagen II型胶原；Chondrex Inc.;
背景描述：
【胶原Collagen】Chondrex Inc.提供各种物种和类型的高度纯化的II型胶原、IX型和XI型软骨胶原，用于建立CIA（胶原诱导的关节炎）模型。CIA可通过II型胶原在啮齿类动物和非人灵长类动物中诱导而成，但有文献报道，XI型胶原也能诱导小鼠和大鼠的关节炎模型，因为XI型胶原的α3（XI）链与II型胶原的α1（II）链一致。另外，IX型胶原的自发性抗体也有助于小鼠多软骨炎发病。科研人员需根据自身实验目的选择合适的胶原物种和类型。
【佐剂Adjuvant】胶原诱导的关节炎（CIA）能在某些小鼠、大鼠和非人哺乳动物品系中成功诱导，通过将II型胶原与佐剂混合免疫的方法。为了成功诱导动物CIA，用来乳化胶原的佐剂类型至关重要。Chondrex Inc.提供不完全佐剂和含各种浓度灭活结核分枝杆菌的完全佐剂从而能用于优化CIA免疫条件。
成功建模需考虑的几大重要因素：
一、供体动物（Animal Vendors）
供体与供体之间，甚至是相同品种内，动物个体间的遗传背景和细菌菌群会变化，这些差异会影响动物对各种试剂的反应，从而干扰试验结果。Chondrex Inc.建议正式开始大规模实验前，需用一个既定的步骤来测试不同供体的动物。
二、饲养条件（Housing Conditions）
细菌菌群对动物的健康非常重要，包括适当的功能性免疫系统。因此，建议在无特异病原（SPF）条件，而不是传统条件下，来饲养动物从而避免细菌菌群变化引起的结果变化。比如，感染小鼠肝炎病毒（MHV）的小鼠不能发展成CIA模型（未公开数据资料）。
用不同商业化的啮齿类动物饲料喂养的小鼠，诱导产生关节炎的频率和严重程度不同。用高脂肪饲料喂养的小鼠具最高的发病率。
三、动物年龄和品系（Animal Age&Strains）
A）小鼠（Mouse）
【年龄Age】：选择至少7-8周龄，具成熟免疫系统的小鼠。老化的小鼠可能呈低发病率和低恶化程度。
【品系Strains】：胶原诱导关节炎（CIA）模型的敏感程度与MHC-class II分子有关，其对免疫用II型胶原产生反应。详见【表1.建立CIA模型的常用大鼠和小鼠品种】。
DBA/1 (H-2q)和B10.RIII (H-2r)小鼠对CIA敏感型很高，DBA/1小鼠对鸡，牛和猪来源的II型胶原有反应，B10.RIII对牛和猪来源的II型胶原有反应，但是对鸡II型胶原反应很弱。
DBA/1 (H-2q)和B10.RIII (H-2r)小鼠对小鼠II型胶原反应很弱。即使用大量的小鼠II型胶原来免疫，CIA发病率仍非常低，约10%。
另外，一些CIA耐性小鼠品种能够用来产生致关节炎抗体，说明CIA不仅是受限制于MHC类型。比如，IFN-γ或IL-10敲除的CIA抗性品种C57BL/6，129/Sv (H-2b)和Balb/c (H-2d)小鼠能够产生致关节炎自抗体和关节炎，这表明关节炎的敏感性也受细胞因子的高度调控。
B）大鼠（Rat）
【年龄Age】：选择至少7-8周龄，具成熟免疫系统的大鼠。
【品系Strains】：高敏感大鼠品系（Sprague-Dawley (SD)(RT1f), Wistar (RT1u)(1), BioBreeding/Diabetes-resistant (BB/DR)(RT1u) (9), Wistar Furth (RT1u), Louvain (LOU) (RT1u), Osborne-Mendal (OM) (RT1u), and Lewis (LEW) (RT1l) rats）；
BB大鼠是用来建立CIA的最好品种。Dark Agouti (DA)大鼠对CIA高度敏感，但对油诱导的关节炎模型（矿物油：IFA，单独）低敏感。因此，DA大鼠的CIA模型可能同时表现出两种不同病理机制。因此，DA大鼠不建议用来建立CIA模型。
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表1. 建立CIA模型的常用大小鼠品种（Mouse and Rat strains commonly used for CIA） |
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| Mouse Strain | H-2 Type | CIA Susceptibility | Rat Strain | MHC RT1 haplotype | CIA Susceptibility |
| DBA/1 | q | High | Sprague-Dawley (SD) | f | High |
| B10.Q | q | High | Wistar | u | High |
| B10.G | q | High | Lewis（Lew） | I | High |
| NFR/N | q | High | BioBreeding (BB)/Diabetes-
resistant (DR) |
u | High |
| SWR | q | Resistant | Wistar Furth | u | High |
| B10.RIII | r | High | Louvain (LOU) |
u | High |
| B10 | b | Low | Osborne-Mendal (OM) | u | High |
| C57BL/6 | b | Low | Dark Agouti (DA) | av1 | High |
| C57BL/6 beige | b | Resistant | |||
| C57BL/6 x
129/Sv |
b | Low | |||
| 129/Sv | b | Resistant | |||
| B10.D2/nSn | d | Resistant | |||
| B10.D2/oSn | d | Resistant | |||
| Balb/c nu/nu | d | Resistant | |||
| C3H/He | k | Low | |||
| B10.S | s | Resistant | |||
| SJL/1 | s | Moderate | |||
| C.B-17 scid/scid | Resistant | ||||
四、佐剂（Adjuvant）
A）小鼠（Mouse）
弗氏完全佐剂（CFA）包含高质量的结核分枝杆菌，对诱导严重的小鼠关节炎是必要的，因其能诱导强烈的免疫反应。不同于大鼠，将II型胶原和不完全佐剂（IFA）乳化在一起不会产生关节炎。
强烈的抗体反应和正确的抗体亚型对诱导小鼠关节炎很重要。抗体产生取决于抗胶原IgG2a和IgG2b亚型水平，它们能活化补体，诱导关节炎的必要步骤。研究显示，含5mg/ml结核分枝杆菌的CFA能成功诱导关节炎，呈高致病率（50-70%），即使是CIA耐性小鼠品种，比如C57BL/6，B10，129/Sv小鼠（H-2b）。
B）大鼠（Rat）
因大鼠通常对佐剂诱导的关节炎（AIA）很敏感，不完全氟氏佐剂（IFA）可用于建模。
五、胶原（Collagen）
使用高纯度的天然II型胶原。去糖基化和变性的胶原都会影响致关节炎性，微弱污染比如胃蛋白酶在T细胞刺激反应中可能会引起假阳性反应。
胶原产品订购：美国Chondrex原装正品，基本现货提供，欢迎来电咨询价格和货期，及技术问题。联系电话：021-54736159，QQ：2716000500。
| 品牌 | 名称 | 货号 | 规格 |
| Chondrex | Immunization Grade Bovine Type II Collagen 牛II型胶原 | 20021 | 10 mg, lyophilized |
| Chondrex | Immunization Grade Bovine Type II Collagen 牛II型胶原 | 20022 | 2 mg/ml x 5 ml |
| Chondrex | Immunization Grade Chick Type II Collagen 鸡II型胶原 | 20011 | 10 mg, lyophilized |
| Chondrex | Immunization Grade Chick Type II Collagen 鸡II型胶原 | 20012 | 2 mg/ml x 5 ml |
| Chondrex | Immunization Grade Porcine Type II Collagen 猪II型胶原 | 20031 | 10 mg, lyophilized |
| Chondrex | Immunization Grade Porcine Type II Collagen 猪II型胶原 | 20032 | 2 mg/ml x 5 ml |
| Chondrex | Immunization Grade Bovine Type IX Collagen 牛IX型胶原 | 1072 | 5 mg, lyophilized |
| Chondrex | Immunization Grade Chick Type IX Collagen 鸡IX型胶原 | 1071 | 5 mg, lyophilized |
| Chondrex | Immunization Grade Porcine Type IX Collagen 猪IX型胶原 | 1073 | 5 mg, lyophilized |
| Chondrex | Immunization Grade Bovine Type XI Collagen 牛XI型胶原 | 1082 | 5 mg, lyophilized |
| Chondrex | Immunization Grade Chick Type XI Collagen 鸡XI型胶原 | 1081 | 5 mg, lyophilized |
| Chondrex | Immunization Grade Porcine Type XI Collagen 猪XI型胶原 | 1083 | 5 mg, lyophilized |
操作流程详见说明书：
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佐剂产品订购：美国Chondrex原装正品，基本现货提供，欢迎来电咨询价格和货期，及技术问题。联系电话：021-54736159，QQ：2716000500。
| 品牌 | 名称 | 货号 | 规格 |
| Chondrex | Complete Freund’s Adjuvant（CFA），1mg/ml 弗氏完全佐剂 | 7008 | 5ml |
| Chondrex | Complete Freund’s Adjuvant（CFA），2mg/ml 弗氏完全佐剂 | 7009 | 5ml |
| Chondrex | Complete Freund’s Adjuvant（CFA），3mg/ml 弗氏完全佐剂 | 7015 | 5ml |
| Chondrex | Complete Freund’s Adjuvant（CFA），4mg/ml 弗氏完全佐剂 | 7001 | 5ml |
| Chondrex | Complete Freund’s Adjuvant（CFA），5mg/ml 弗氏完全佐剂 | 7023 | 5ml |
| Chondrex | Incomplete Freund’s Adjuvant（IFA）弗氏不完全佐剂 | 7002 | 5ml |
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio懋康所有】