——Clontech/Takara 酵母菌/真菌转化实验选择性抗生素/酵母单杂交/双杂交研究
搜索关键词：选择性抗生素；酵母菌转化系统【酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、念珠菌】；真菌转化系统【构巢曲霉、黑曲霉】；酵母单杂交/双杂交；AUR1基因；AURA基因；IPAC合成酶；AUR1-C突变基因；
基本描述：
金担子素A（Aureobasidin A，AbA），也称为短梗霉素A，一种来源于丝状真菌Aureobasidium pullulansNo. R106的环酯肽类抗真菌抗生素，在较低浓度（0.1-0.5μg/ml）下即可对酵母菌产生毒性，对该抗生素敏感的真菌包括：酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）、光滑念珠菌（Candida glabrata）、构巢曲霉（Aspergillus nidulans）和黑曲霉（Aspergillusniger.）。金担子素AbA通过抑制真菌生长所依赖的肌醇磷脂酰神经酰胺合成酶（Inositol phosphorylceramide (IPC) synthase）活性，阻碍神经酰胺到肌醇磷脂酰神经酰胺的合成，导致鞘脂类物质的合成量不足，细胞膜破裂，进而杀死菌株。研究发现，来自酿酒酵母菌的AUR1和构巢曲霉的AURA基因，两者具有同源性，都能够编码IPC合成酶，对这两种基因的点突变，也都赋予菌株对AbA产生很强的抗性，比如：突变基因AUR1-C。
AbA用作选择性标记的应用和优势：
1. 酵母转化研究中，金担子素A（AbA）是一种非常有效的选择性标志；
2. 使用上基本不需优化条件，且创造极低背景。AbA抗性是酵母双杂交研究中理想的报告子，兼容于携带相应抗性的酵母单杂交/双杂交系统，并提供良好的筛选结果。
携带AbA抗性基因（AUR1-C）的商业化载体：
1. 大肠杆菌-酵母菌穿梭载体/大肠杆菌-曲霉穿梭载体（shuttle vector）
简单描述：pAUR载体系统包含六种大肠杆菌-酵母菌穿梭载体，每一种特别改造用于酿酒酵母、粟酒裂殖酵母或者构巢曲霉，这些载体都涵盖一个新型的药物抗性选择性标志（金担子素Aureobasidin A抗性），使得酵母菌或丝状真菌具有此抗性。
| 载体 | 货号 | 规格 | 特点 |
| pAUR101 DNA | 3600 | 20μg | 在酵母细胞内不会自主复制，仅通过重组方法整合进入染色体才能保留在细胞内。染色体整合和酿酒酵母菌转化用载体。含来自酿酒酵母菌的AbA抗性基因-AUR1-C。大肠杆菌-酵母菌穿梭载体； |
| pAUR112 DNA | 3601 | 20μg | 含CEN/ARS区域，在酵母细胞内能自主复制，因此细胞分裂过程能保持稳定。含AmpR和URA3基因（尿嘧啶选择性标记），来自酿酒酵母菌的AbA抗性基因-AUR1-C。大肠杆菌-酵母菌穿梭载体； |
| pAUR123 DNA | 3602 | 20μg | 来自酿酒酵母菌的AbA抗性基因-AUR1-C。蛋白表达载体和来源于pAUR112的大肠杆菌-酵母菌穿梭载体；含用于酵母细胞蛋白表达用的ADH1持续性启动子； |
| pAUR135 DNA | 3604 | 20μg | Vector for marker removal in S. cerevisiae；大肠杆菌-酵母菌穿梭载体； |
| pAUR224 DNA | 3603 | 20μg | 含来自粟酒裂殖酵母的AbA抗性基因-aur1R；蛋白表达载体，含粟酒裂殖酵母中发挥作用的CMV持续性启动子； |
| pAUR316 DNA | 3605 | 20μg | 构巢曲霉内能够自主复制；来自构巢曲霉的AbA抗性基因-aurAr以及AMA1区域（复制起始区）和AmpR；大肠杆菌-曲霉穿梭载体； |
2. 酵母报告基因载体（yeast reporter vector）
|
载体名称 |
特点 | 备注 |
| pAbAi Vector | 用于单杂交（one-hybrid）实验的酵母报告载体，可用来鉴定和分类DNA结合蛋白。特别设计兼容于Matchmaker Gold酵母单杂交筛选系统，顺式作用元件（靶向序列）可插入MCS用作诱饵以筛选GAL4 AD/cDNA融合文库；目标蛋白-DNA的相互作用驱动AUR1-C抗性基因表达，从而能筛选到AbA抗性酵母； | Matchmaker Gold酵母单杂交系统 |
| p53-AbAi Vector | 酵母报告载体，配合Matchmaker Gold酵母单杂交筛选系统的阳性对照载体；含p53结合序列（顺式作用元件）；AbA抗性基因AUR1-C的表达受GAL4 AD-p53与p53结合序列的相互作用而诱发；p53-AbAi在酵母细胞内不能游离繁殖，仅当整合进入宿主染色体才可以稳定存在，通过载体上的URA3基因和酵母菌株上的非功能ura3-52 locus发生同源重组以实现整合。另，含ColE1复制起始子和AmpR，可实现大肠杆菌内的扩增和复制。 |
基本特性：
1） 同义名：短梗霉素A
2） 分子式：C60H92N8O11
3） 分子量：1100Da
4） 纯度：≥95%
5） 熔点：155-157℃
6）溶解性：不溶于水，易溶于甲醇、乙醇（0.5-5mg/ml）
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或直接参考Clontech官网：http://www.clontech.com/CN/Products/Protein_Interactions_and_Profiling/Yeast_Two-Hybrid/Aureobasidin?sitex=10022:22372:US
| 品牌 | 货号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） | 货期 |
| Clontech | 630466 |
Aureobasidin A for Yeast Two-Hybrid Studies【1mg/ml in methanol特殊包装，经济实惠】 |
1mg | 1200 | 现货 |
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