硫化氢(H2S)荧光探针产品专题—WSP-1/WSP-5

专题关键词:

Hydrogen sulfide (H2S)硫化氢;H2S Probe 硫化氢探针;Washington State Probe(WSP);NaHS (H2S donor);胱硫醚-γ-裂解酶(CSE);DL-Propargylglycine(PAG);CAS:1352750-34-5;

背景描述

硫化氢(H2S)是第三大气体介质,另两种是一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO),在哺乳动物的免疫学、神经学、心血管和呼吸系统中发挥显著的生理效应。哺乳动物体内H2S归因于至少三种内源性酶:胱硫醚-β-合成酶(Cystathionine-β-synthase,CBS),细胞胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine γ-lyase,CGL,CSE),3-巯基丙酮酸硫基转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,3-MST),这些酶在不同的器官和组织内,使用半胱氨酸或半胱氨酸衍生物为底物,并将其转化为H2S。

H2S作为一种高度反应性分子,能够与大量的生物靶标反应,这些反应涉及到H2S的各种生理功能。比如,H2S立即与高铁血红蛋白反应生成硫化血红蛋白,后者可用作H2S的代谢库。H2S是一种强效的还原剂,很可能与内源性氧化剂如过氧亚硝基阴离子,超氧化物和过氧化氢反应。能引起蛋白硫巯基化修饰(-SSH),这是一种重要的蛋白翻译后修饰,提供一种可能机制使得H2S改变细胞内大量的蛋白和酶的功能。尽管如此,内源性H2S的生成以及外源注射H2S对许多疾病都表现出保护效应,为此,了解H2S的化学和特征,以及开发一种有效且方便的方法来检测生物体系内H2S显得十分重要。

产品特点

我司提供一系列新开发的高效且便捷的硫化氢(H2S)荧光探针——Washington State Probe(WSP)(WSP-1, WSP-2, WSP-3, WSP-4, WSP-5),这类探针由M. Xian团队开发并经多方验证非常适合生物样本的H2S检测。这类探针的特点如下:

1)低背景:探针本身荧光背景非常低,这对H2S的高灵敏检测至关重要。这些探针的羟基基团被酯化,因此呈现出弱荧光和弱的量子产量(Φf < 0.1,见下表1)。

Probes λex (nm) λem (nm) Φf
WSP-1 476 516 0.003
WSP-2 385 456 0.003
WSP-3 550 586 0.014
WSP-4 512 531 0.088
WSP-5 502 525 0.020
[λem] The maximal emission of the probes. [Φf] The fluorescence quantum yield.

2)灵敏度:探针能与H2S快速结合荧光信号显著加强,仅几分钟荧光信号急剧增加且达到稳态(见表2)。在梯度浓度的H2S体系中,最大发射波长下的荧光信号与浓度呈现良好的线性关系。

Probes       Turn-on folds DL/nM  
WSP-1 130 60
WSP-2 275 79
WSP-3 68 47
WSP-4 20 266
WSP-5 60 47
DL is the detection limit (3S/m, in which S is the standard deviation of blank        

measurements, n = 11, and m is the slope of the linear equation).

3)选择性:探针表现出良好的H2S特性行结合,与包括Cys和GSH在内的反应性硫类物质相比(见Fig 1)。

Fig 1. Fluorescence intensity of the probes (10 μM) in the presence of various reactive sulfur species: 1) control; 2) 50 μM NaHS; 3) 200 μM Cys; 4) 200 μM GSH; 5) 200 μM Hcy; 6) 200 μM Na2SO3; 7) 200 μM Na2S2O3; 8) 50 μM NaHS + 200μM Cys; 9) 50 μM NaHS + 200μM GSH. WSP1 (a), WSP2 (b), WSP3 (c), WSP4 (d), and WSP5 (e).

4)稳定性:在细胞内酯酶(esterase E-0887,from rabbit liver)存在的情况下探针表现出良好的稳定性。适合活细胞荧光成像研究(见Fig 2)。

Fig 2. Fluorescence intensity of the probe (10 μM). 1) control, without the esterase; 2) incubate with esterase (0.06 U/mL) at room temperature for 30 min; 3) incubate with 50 μM NaHS for 5 min after 2). WSP1 (a), WSP4 (b), WSP5 (c).

5)适用性:适用于细胞内H2S检测(Fig 3)。

Fig 3. Fluorescence images of H2S in HeLa cells usingWSP4andWSP5. (a-f) Cells on 24-well plate were incubated withWSP4(30 μM) for 30 min, then washed and subjected to different treatments. (a and b) control (no NaHS was added); (c and d) treated with 30 μM NaHS; (e and f) treated with 60 μM NaHS. (g-l) Cells on 24-well plate were incubated withWSP5(50 μM) for 30 min, then washed and subjected to different treatments. (g and h) control (no NaHS was added); (i and j) treated with 50 μM NaHS; (k and l) treated with 100 μM NaHS. (Scale bar: 100 nm)

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产品名称 产品编号             CAS NO.              规格              价格(元)    
WSP-1 (H2S Probe) 硫化氢荧光探针        MX5301-1MG    1352750-34-5    1mg 820
WSP-1 (H2S Probe) 硫化氢荧光探针 MX5301-5MG 1352750-34-5 5mg 2980
WSP-5 (H2S Probe) 硫化氢荧光探针    MX5302-1MG 1593024-78-2 1mg 980
WSP-5 (H2S Probe) 硫化氢荧光探针 MX5302-5MG 1593024-78-2 5mg                3520

见我司网站查看具体探针的化学特征和使用方法。

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产品名称 产品编号 规格 价格(元)    用途(目的)
Hypotaurine 亚牛磺酸 MX5305-50MG     50mg      350 H2S scavenger(H2S清除剂)
DL-Propargylglycine DL-炔丙基甘氨酸  MX5306-250MG 250mg        590 CSE Inhibitor

(H2S合成酶胱硫醚-γ-裂解酶

CSE的不可逆抑制剂)

DL-Propargylglycine (hydrochloride)

DL-炔丙基甘氨酸盐酸盐

MX5307-250MG 250mg 590
GYY 4137 (H2S Donor) 硫化氢供体 MX5308-10MG 10mg 870 H2S slow-releasing donor

(H2S缓释供体)

H2S Donor 5a 硫化氢供体5a MX5309-1MG 1mg 495 半胱氨酸活化H2S供体
Sodium hydrogen sulfide

硫氢化钠(Alfa咨询)

87389.04 2g 1603 H2S donor(H2S供体)

注意事项

1)所有产品仅供科研用途,绝不可用作临床或诊治用途。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio懋康所有】