INVSc1 Chemically Competent Cell
酵母菌化学感受态细胞
产品信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
| INVSc1 Chemically Competent Cell
酵母菌化学感受态细胞 |
MF2372-1000UL | 10×100μl | 320 |
| MF2372-5000UL | 50×100μl | 1360 |
产品包装
| 组分编号 | 组分名称 | 保存 | 货号（规格） | |
| MF2372-1000UL | MF2372-5000UL | |||
| MF2372-A | INVSc1 Chemically Competent Cell | -80℃ | 10×100μl | 50×100μl |
| MF2372-B | pYES2 Control Vector (10ng/μl) | -80℃ | 10μl | 10μl |
| MF2372-C | Carrier DNA (10μg/μl) | -20℃ | 100μl | 500μl |
| MF2372-D | PEG/LiAC Solution | +4℃ | 5ml | 25ml |
保存与运输方法
保存：其中感受态细胞按标签注明置于-80℃保存，三个月有效。其他组分按照标签注明保存，一年有效。
运输：干冰运输。
产品描述
INVSc1菌株是一种快速生长的酿酒酵母菌，是一款非常理想的重组蛋白表达菌株，但因孢子生成能力弱，不适合用于基因分析研究。配套的质粒有：pYES3/CT、pYC 2、pYES2系列。当这些质粒（比如：pYES2）与INVSc1菌配套使用，会激活pYES2质粒上的GAL1启动子的转录，进而启动下游重组蛋白的表达。INVSc1是二倍体细胞，是组氨酸、亮氨酸、色氨酸、尿嘧啶缺陷型菌株，可直接通过PEG/LiAc将pYES2质粒转化进入INVSc1细胞内。质粒pYES2的筛选标志为URA，可用SD-URA平板进行筛选。
本品为经特殊工艺制备的INVSc1酵母菌化学感受态细胞，用pYES2质粒检测转化效率＞104 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存三个月。
基因型
MATa his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52/MATα his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52
注意事项
1） 最好在冰上融化感受态细胞。
2） 转化高浓度质粒可相应减少用于涂板的菌量。同时转化2-3种质粒可适当增加质粒的用量。
3） INVSc1对高温敏感，最适生长温度为27-30℃，一旦高于31℃，生长速度和转化率都呈指数下降。
4） 酵母菌在缺陷培养基上生长速度比YPDA培养基慢，营养缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂YPDA平板于29℃，48h培养可见直径1mm克隆；涂SD单缺平板于29℃，48-60h培养可见直径1mm克隆；涂SD双缺平板于29℃，60-80h培养可见直径1mm克隆；涂SD三缺或四缺平板于29℃，80-90h培养可见直径1mm克隆；
5） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1） 取100 µl冰上融化的INVSc1化学感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5 µg，预处理的Carrier DNA（95-100℃水浴3 min或95℃金属浴5min，快速冰浴3min。重复一次。处理完快速插入冰中，待用。）10 µl，PEG/LiAc 500µl，用枪吹打几次充分混匀，30℃水浴30 min（在15min时翻转6-8次混匀）。
2） 之后将管子放42℃水浴15 min（在7.5min时翻转6-8次混匀）。
3） 5000 rpm离心40s弃上清，用400 µl ddH2O重悬沉淀，离心30s弃上清。
4） 用50 µl ddH2O重悬，涂板，放入29℃培养48-96 h。
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| MS6368-5L | SD/-Ura with Agar酵母缺陷型培养基（琼脂） | 10×0.5 L |
| MS6319-10G | DO Supplement -Ura | 10g |
| MS6305-100G | YNB Without Amino Acids酵母氮源基础（无氨基酸） | 100g |
附录I培养基配制
一、质粒筛选用培养基：SD/-Ura培养基配制（1L）
酵母氮源基础（YNB） 6.7g
葡萄糖 20g
氨基酸缺陷混合物（DOsupplement-Ura for pYES2） 适量（详见说明书）
补水到1L，用1M NaOH调pH至5.8。
琼脂粉（Agar） 20g（仅限固体培养基）
121℃，15min高压灭菌。
二、蛋白诱导用培养基：SGR/-Ura培养基配制（1L）
酵母氮源基础（YNB） 6.7g
氨基酸缺陷混合物（DOsupplement-Ura for pYES2） 适量（详见说明书）
补水到800 mL，用1M NaOH调pH至5.8。
121℃，15min高压灭菌。
待培养基温度冷却到55℃左右，加入已过滤的碳源：100ml 20%半乳糖，100m 10%棉子糖。混匀即可。
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归集麒生物/MKBio懋康所有】
