LysoSensor Green DND-189 绿色溶酶体荧光探针

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SKU: MX4321-50UL 分类: 标签:

描述

LysoSensor Green DND-189

绿色溶酶体荧光探针

产品信息

产品名称

产品编号 规格

价格(元)

LysoSensor Green DND-189 MX4321-50UL 50µl

583

 

产品描述

为满足研究者研究活细胞内溶酶体生成和功能的动力学特征,特此开发Lysosensor探针,一种区分酸性细胞器的荧光pH指示剂。该系列染料属于向酸性探针,由于质子化聚集在酸性细胞器上。这一质子化也使得因弱碱性侧链而封闭荧光的探针得以荧光释放,促使荧光信号增强。因此,LysoSensor探针遇酸后荧光信号呈现pH依赖性的增强。

LysoSensor Green DND-189(绿色溶酶体探针)可用于测量溶酶体等酸性细胞器的pH值。LysoSensor染料在酸性环境下的荧光会增强。LysoSensor™Green DND-189的pKa为大约5.2。

本品为DMSO储存液,浓度为1mM。用于活细胞的溶酶体染色,建议工作浓度为≥1µM,需根据实际情况做优化调整。

产品特征

1) 外观:溶液

2) 浓度:1mM in DMSO

3) 亚细胞定位:溶酶体

4) 颜色:绿色

5) 检测仪器:荧光显微镜

6) Abs(nm):443

7) Em(nm):505

8) 化学结构式:

 

 

 

保存与运输方法

保存:≤-20ºC避光干燥保存,收到货至少12个月有效。 

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 整个染色过程中需注意避光。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简单低速离心使溶液降至管底。第一次使用请将本品按单次用量分装保存,≤-20°C避光干燥保存,尽量避免反复冻融。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。

1. 工作液的配制
利用生长培养基或合适的缓冲液将1mM储存液稀释至工作浓度,工作液需现配现用。对于Lysosensor系列溶酶体探针,推荐工作液浓度≥1µM;

【注意】:

1)为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。

2)若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育,会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。

2.染色步骤(贴壁细胞)
1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。
2)待细胞生长到合适密度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含探针培养基(必须完全覆盖住细胞),在适合特定细胞类型的生长条件下孵育细胞30min-2h(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
3)利用不含探针的新鲜培养基替换上述染色液,并且用装有合适滤片的荧光显微镜进行观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间,使得染料能聚集在溶酶体上。

3.染色步骤(悬浮细胞)
1)离心沉淀细胞,吸除上清。
2)利用适量 37℃预热的含探针培养基重悬细胞,在适合特定细胞类型的生长条件下孵育细胞30min-2h(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养基重悬细胞。

4)用装有合适滤片的荧光显微镜进行观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间,使得染料能聚集在溶酶体上。

【注意】:

另一种方法,悬浮细胞可能会粘附到经BD Cell-Tak处理的盖玻片上,此时,可用类似于贴壁细胞的方法进行染色。

 

 

附录I 溶酶体探针总表

货号 名称 Abs (nm)[1] Em(nm)[1] pKa
MX4320-50UL LysoTracker Blue DND-22蓝色 373 422 N/A
MX4318-50UL LysoTracker Green DND-26绿色 504 511 N/A
MX4317-50UL LysoTracker Red DND-99红色 577 590 N/A
MX4319-50UL LysoTracker Deep Red远红 647 668 N/A
MX4316-50UL LysoSensor Yellow/Blue DND-160黄/蓝色 329,384[2] 440,540[2] 4.2
MX4321-50UL LysoSensor Green DND-189绿色 443 505 5.2
[1]:在水溶性缓冲液或甲醇中测定的最大吸收和发射波长;在细胞环境内数值可能会有些许差异。

[2]:最大双吸收和发射波长,对pH敏感。

 

溶酶体系列探针常见问题

1. 如何选择合适的溶酶体探针?

答:对于溶酶体定位实验,请选择Lysotracker系列探针,根据自身的实验体系,结合lysotracker系列探针的荧光特征,选择合适激发和发射波长的荧光探针。Lysotracker Blue DND-22(MX4320-50UL)探针的光量子产率偏低,建议在非荧光选择受限的情况下,推荐选择其他几款Lysotracker探针。对于酸性细胞器(比如溶酶体)的pH测定实验,请选择Lysosensor系列探针。

2. 溶酶体探针染色后是否能做固定?

3. 溶酶体探针是否能用于流式分析和荧光光度计分析?

4. 溶酶体探针LysoTracker Green DND-26(MX4318-50UL) 和LysoSensor Yellow/Blue DND-160

(MX4316-50UL)的建议孵育时间多少?

其他信息

重量 50 克
品牌:

懋康MKBio

CAS:

N/A

规格:

50µl

货期:

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