描述
High Sensitivity Rabbit IHC Kit
高灵敏度免疫组化试剂盒(兔一抗来源)
产品特点:
类似于Vector Lab的VECTASTAIN ABC kit,使用Biotin/Avidin/Biotin+DAB显色系统,适用于广谱的免疫组化检测。
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
High Sensitivity Rabbit IHC Kit
免免疫组化试剂盒(兔一抗来源) |
MM1705-100T | 50-100T | 1413 |
MM1705-200T | 100-200T | 2813 |
【温馨提示】:原SP法(streptavidin/biotin-HRP)检测系统不再供应,现在更换为ABC法(Biton/avidin/biotin-HRP)检测系统,具高灵敏度,高特异性,高清晰和低背景的特点。
产品描述
免疫组化试剂盒(兔一抗来源)(Rabbit IHC Kit)是一款特异性检测一抗来源为兔单克隆或多克隆的免疫组化试剂盒,检测原理基于高灵敏度、高特异性和高清晰的生物素-亲和素-生物素信号放大系统,以及辣根过氧化物酶催化底物DAB显色,从而识别目标抗原的过程。本品适用于石蜡切片、冰冻切片、细胞涂片以及血液标本。
产品组成
组分编号 | 组分名称 | 产品规格 | |
50-100T | 100-200T | ||
MM1705-A | Blocking serum封闭血清 | 300μl | 2×300μl |
MM1705-B | Biotin-conjugated anti-rabbit IgG生物素化山羊抗兔IgG | 100μl | 2×100μl |
MM1705-C | Avidin亲和素 | 200μl | 2×200μl |
MM1705-D | Biotin-conjugated HRP生物素化辣根过氧化物酶 | 200μl | 2×200μl |
MM1705-E | Concentrated DAB Stain DAB显色浓缩液 | 300μl | 2×300μl |
MM1705-F | DAB Dilution Buffer DAB底物稀释液 | 10ml | 2×10ml |
保存与运输方法
保存:2-8℃保存,1年有效,不可冻存。其中,组分E+F需避光保存。
运输:冰袋运输。
注意事项
1) 建议检测目的标本的同时,设置阴性对照和阳性对照。
2) DAB具潜在致癌性,操作时注意防护,避免直接接触皮肤。
3) DAB工作液需现配现用,避光放置,需在30min内完成染色。
4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
用户自行准备试剂
1.1 二甲苯、乙醇、无水甲醇 | 1.2 蒸馏水或去离子水 |
1.3 抗原修复液、内源性过氧化物酶封闭试剂、免疫组化笔等辅助试剂 | 1.4 10mM PBS,pH 7.5 |
1.5 一抗(宿主为兔) | 1.6 苏木素染色液等复染剂 |
1.7 中性树胶封片剂 | 1.8光学显微镜 |
操作方法
一、工作液的准备
1.1 封闭血清工作液:取30μl组分A(封闭血清)加入2ml缓冲液中,混合均匀。
1.2 二抗工作液:取30μl组分A(封闭血清)加入2ml缓冲液中,再加入10μl组分B(生物素化山羊抗兔IgG)混合均匀。
1.3 ABC工作液:取20μl组分C(亲和素)加入1ml缓冲液中,再加入20μl组分D(生物素化辣根过氧化物酶),立即混合,使用前静置15~30min。
1.4 DAB底物工作液:取30μl组分E(DAB显色浓缩液)滴加到1ml组分F(DAB底物稀释液)中,使用前充分混合,现配现用。
【注意】:
j 请根据需要染色的切片数量按比例配制工作液;
k缓冲液推荐用10mM含0.9% NaCl的磷酸钠盐缓冲液(PBS, pH 7.5),缓冲液内不可加入NaN3。
二、染色步骤(以切片为例)
2.1 石蜡切片用二甲苯或其他透明剂及梯度乙醇进行脱蜡和水化。
冷冻切片或细胞样本,如有必要,可以用丙酮或其他适当固定剂固定抗原。
以上步骤完成后,用水清洗切片5min。
2.2 如果有需要,可进行抗原修复和封闭内源性过氧化物酶的步骤。
2.3 上述步骤完成后,用缓冲液清洗切片5min。
2.4 滴加100μl或适量的封闭血清工作液,室温孵育20min。
2.5 去除切片上多余的封闭血清。
2.6 滴加100μl或适量的一抗工作液,孵育30min。
2.7 用缓冲液清洗5min。
2.8 滴加100μl或适量的二抗工作液,孵育30min。
2.9 用缓冲液清洗5min。
2.10 滴加100μl或适量的ABC工作液,孵育30min。
2.11 用缓冲液冲洗5min。
2.12 加入适量新鲜配制的DAB底物工作液,室温孵育2~10min,直至产生所需的染色强度。
2.13 用水冲洗5min。
2.14 复染(可选)透明、封片。
2.15 光学显微镜下观察。
三、染色结果
阳性染色:在抗原定位处被染成棕黄或棕褐色。
相关产品
货号 | 名称 | 规格 |
MM1010-100ML | 苏木素染色液 | 100ml |
MM1504-100ML | 4% Paraformaldehyde 4%多聚甲醛 | 100ml |
MM0707-500ML | 30% H2O2Solution 30%过氧化氢溶液 | 500ml |
MM1503-100ML | Neutral Balsam Mounting Medium中性树胶封片剂 | 100ml |
MM1501-118ML | OCT冰冻切片包埋剂 | 118ml |
MM1502-1EA | Hydrophobic Barrier Pen (PAP Pen)疏水屏障免疫组化笔 | 1支 |
MM1706-100T | High Sensitivity Mouse IHC Kit免疫组化试剂盒 | 50-100T |
MM1706-100T | High Sensitivity Mouse IHC Kit免疫组化试剂盒 | 50-100T |
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归集麒生物/MKBio懋康所有】