Aureobasidin A (AbA)金担子素A(1 mg/ml)

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Aureobasidin A(AbA)金担子素A

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选择性抗生素;酵母菌转化系统【酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、念珠菌】;真菌转化系统【构巢曲霉、黑曲霉】;酵母单杂交/双杂交;AUR1基因;AURA基因;IPAC合成酶;AUR1-C突变基因;

产品信息

产品名称                                                              

产品编号           规格            价格(元)  

Aureobasidin A(AbA)金担子素A(1 mg/ml)

MS0002-1ML 1ml 1200
Aureobasidin A(AbA)金担子素A(1 mg/ml) MS0002-5ML 5×1ml

5400

Aureobasidin A(AbA)金担子素A(冻干粉) MS0002-10MG 10mg

8800

【温馨提示】:见我司整理的酵母双杂交检测(Yeast two-hybrid assay)产品专题

产品描述

金担子素A(Aureobasidin A,AbA),也称为短梗霉素A,一种来源于丝状真菌Aureobasidium pullulansNo. R106的环酯肽类抗真菌抗生素,在较低浓度(0.1-0.5μg/ml)下即可对酵母菌产生毒性,对该抗生素敏感的真菌包括:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)、光滑念珠菌(Candida glabrata)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)和黑曲霉(Aspergillusniger.)。金担子素AbA通过抑制真菌生长所依赖的肌醇磷脂酰神经酰胺合成酶(Inositol phosphorylceramide (IPC) synthase)活性,阻碍神经酰胺到肌醇磷脂酰神经酰胺的合成,导致鞘脂类物质的合成量不足,细胞膜破裂,进而杀死菌株。研究发现,来自酿酒酵母菌的AUR1和构巢曲霉的AURA基因,两者具有同源性,都能够编码IPC合成酶,对这两种基因的点突变,也都赋予菌株对AbA产生很强的抗性,比如:突变基因AUR1-C。

酵母转化研究中,金担子素A(AbA)是一种非常有效的选择性标志,使用上基本不需优化条件,且创造极低背景。AbA抗性是酵母双杂交研究中理想的报告子,兼容于携带相应抗性的酵母单杂交/双杂交系统,并提供良好的筛选结果。

我司提供两种形式的本品,一种以溶于甲醇的储存液形式提供,浓度1mg/ml,且规格小,适合需量较少用户,经济实惠;一种以冻干粉形式提供,运输方便且稳定性相对较高,适合需量多的用户。AbA常用筛选浓度为100-200ng/ml,具体的筛选浓度取决于宿主细胞的敏感度【见附表1】。

产品特性

1)同义名:短梗霉素A

2)分子式:C60H92N8O11

3)分子量:1100Da

4)纯度:≥95%

5)熔点:155-157℃

6)溶解性:粉末不溶于水,易溶于甲醇、乙醇(0.5-5mg/ml)

7)化学结构式:

保存与运输方法

保存:冻干粉室温保存,至少1年有效;储存液(1mg/ml)置于2-8℃保存,至少6个月有效。

运输:冻干粉室温运输,储存液(1mg/ml)冰袋运输。

使用方法

1)对于金担子素A(1 mg/ml)储存液(货号:MS0002-1ML,MS0002-5ML):直接用酵母培养基稀释到所需的筛选浓度,常用的筛选浓度为100-200ng/ml,具体的筛选浓度受宿主细胞的敏感度影响。

2)对于金担子素A粉末(货号:MS0002-10MG):用无水乙醇或甲醇将粉末会从分溶解配制成0.5-5mg/ml储存液,2-8℃保存。实验前,用酵母培养基稀释到所需筛选浓度即可。

应用示例(来自文献资源)

A.酵母单杂系统Y1Hgold:

文献①:The screening and functional study of proteins binding with the BmNPV polyhedrin promoter.PMID: 22559085

用量:用来抑制Y1HGold (p53-AbAi)酵母菌株基础表达的AbA最低浓度为200ng/ml;用来抑制Y1HGold (p3rep-AbAi)和Y1HGold (p3mut-AbAi])酵母菌株基础表达的AbA最低浓度为300ng/ml。

文献②:BjMYB1, a transcription factor implicated in plant defence through activating BjCHI1 chitinase expression by binding to a W-box-like element. PMID: 27353280

用量:为了开展Y1H筛选,用来抑制Y1Hgold [pBait-AbAi]和Y1Hgold [pBait-m-AbAi]酵母菌生长的AbA最低抑制浓度在SD/−Ura/+AbA培养基上首先确认后为550ng/ml。

文献③:Two Types of Etiological Mutation in the Limb-Specific Enhancer of Shh.PMID: 28710291

用量:第一次筛选,cDNA和线性pGADT7载体共转化进入Y1HGold [Hx-pAbAi],转化子涂布在含200ng/ml AbA的SD-Leu培养基。

B.酵母双杂系统Y2Hgold:

文献①:PbTTG1 forms a ribonucleoprotein complex with polypyrimidine tract-binding protein PbPTB3 to facilitate the long-distance trafficking of PbWoxT1 mRNA. PMID: 30824022

用量:简言之,转化进pGBKT7-PbPTB3的Y2HGold用作诱饵来筛选含pGADT7载体的Y187(含cDNA文库)转化子。两者在30℃接合24h,在含X-α-Gal和300ng/ml AbA的DDO (SD/-Leu/-Trp)培养基筛选3-5天。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

附表1 金担子素(Aureobasidin, AbA)对不同酵母菌的最低抑菌浓度

表1 AbA对不同酵母菌的最低抑菌浓度(MIC)

菌株类型

MIC (ng/ml)

Saccharomyces cerevisiae           

酿酒酵母

ATCC9763 (diploid) 200-400

SH3328 (haploid)

100

Sake yeast (diploid)

100-200

Shochu yeast (diploid)

100

Beer yeast (triploid or tetraploid)     

100

Baker’s yeast (diploid)

200-400                   

Schizosaccharomyces pombe

粟酒裂殖酵母

JY-745 (monoploid) 100
Candidaalbicans白色念珠菌 TIMM-0136 (diploid)

40

Candidatropicalis热带念珠菌 TIMM-0324 (diploid)

80

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio懋康所有】

 

其他信息

重量 50 g
品牌:

懋康MKBio

CAS:

/

规格:

1ml

货期:

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